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PCR八聯(lián)管的兩種使用方法,趕緊來學(xué)習(xí)一下吧!
更新時間:2022-11-07瀏覽:2781次
  PCR八聯(lián)管的兩種使用方法如下:
 
  一、負壓法
 
  1、正確連接負壓裝置,將96孔DNA制備板放置在負壓裝置上;向PCR、酶消化、酶標(biāo)記或測序反應(yīng)溶液中加入3倍的PCR-A緩沖液μl。加入100μl);充分混合并轉(zhuǎn)移至96孔DNA制備板,打開并將負壓調(diào)節(jié)至-25-30英寸汞柱,然后慢慢吸出板中的溶液。
 
  2、加入0.3ml緩沖液W2并吸收溶液。使用相同的方法用0.3ml緩沖液W2洗滌兩次。確認將無水乙醇添加到試劑瓶上規(guī)定體積的緩沖液W3濃縮液中。
 
  3、保持負壓,提取96孔DNA制備板10分鐘。
 
  4、將96孔DNA制備板在長纖維組織中粉碎6次,引流管向下。
 
  5、將96孔DNA制備板置于96孔V形板上,加入25-30ul水或洗脫至膜中心,并在室溫下靜置1分鐘。通過3000×G離心5分鐘以洗脫DNA。
 
  二、離心法
 
  1、在PCR、消化、酶標(biāo)記或測序反應(yīng)中添加3倍體積的緩沖液PCR-A(如果緩沖液PCR-A小于100μl加100μl);混合并轉(zhuǎn)移至制備板96孔中的96孔DNA。將DNA制備板放入96孔1.6ml深孔板×G離心器中1分鐘,并丟棄濾液。
 
  2、將0.3ml緩沖溶液W2加入96孔DNA制備板×G離心1分鐘,并丟棄濾液。用0.3ml緩沖液W2以同樣的方法再次洗滌。確認無水乙醇添加到試劑瓶上規(guī)定體積的緩沖液W1濃縮液中。
 
  3、將96孔DNA制備板放入96孔1.6ml深孔板×G離心機中10分鐘。
 
  4、將96孔DNA制備板置于干凈的96孔V形基板中,加入25-30ul水或洗脫至膜中心,并在室溫下放置1分鐘。通過3000×G離心5分鐘以洗脫DNA。
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