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本生簡(jiǎn)述:血清使用中的常見(jiàn)問(wèn)題解答
1, 血清存儲(chǔ)方法?
血清一般儲(chǔ)存于-20℃,同時(shí)應(yīng)避免反復(fù)凍融。購(gòu)買(mǎi)大包裝的血清后,若無(wú)法一次用完,建議分裝成小包裝,儲(chǔ)存于-20℃。
2, 如何解凍血清?
使用前融化,融化時(shí)最好先置于2-8℃冰箱中使之溶解,然后在室溫下使之全溶,溶解過(guò)程
中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。融化后的血清在4℃不宜長(zhǎng)時(shí)間存放,應(yīng)盡快使用。
3,血清的使用濃度是多大?
使用濃度一般為5-20%,常用是10%。過(guò)多血清容易使培養(yǎng)中的細(xì)胞發(fā)生變化,特別是一些二倍體的無(wú)限細(xì)胞系,迅速生長(zhǎng)之后容易發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。
4,血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理?
血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多原因,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性造成的;而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會(huì)存在于血清中,亦是造成血清沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量。 若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無(wú)菌離心管中,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾。我們不建議您以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞您的過(guò)濾膜。
5.何謂熱滅活?有必要做熱滅活嗎?
一般以56℃,30分鐘水浴來(lái)處理已解凍的血清,因?yàn)榇思訜岵襟E,可以使補(bǔ)體去活性,而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞活性,平滑肌的收縮,肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放,增強(qiáng)吞噬作用,淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和激活。
實(shí)驗(yàn)顯示,經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清,對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)過(guò)處理的血清對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn),或沒(méi)有任何作用,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。而經(jīng)過(guò)熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì)顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點(diǎn)",常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會(huì)使此沉淀物更增多,使研究者認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。因此我們建議您,若非必須,您可以不需要做熱滅活這一步。如此以來(lái),不但節(jié)省您寶貴的時(shí)間,更確保您血清的質(zhì)量!
6.如何避免沉淀物的出現(xiàn)?
我們建議您在使用血清的時(shí)候,注意正確的血清解凍步驟,并盡量避免滅活血清及長(zhǎng)時(shí)間的將血清置于高溫環(huán)境中。
血清 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿(mǎn)足客戶(hù)的需求。與客戶(hù)的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來(lái)。
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